如何才能獲得單克隆抗體它有何

編輯：小小寵來源：寵搜網

摘要

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備，雜交瘤（hybridoma）抗體技術是在細胞融合技術的基礎上，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群，可制備針對一種抗原表位的特異性抗體，即單克隆抗體。

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單克隆抗體是什么

1、單克隆抗體的概念

單克隆抗體，英文名為MonoclonalAntibody（mAb），是指由單一克隆B細胞株所產生的能夠特異性結合單一抗原的抗體。與傳統的多克隆抗體相比，單克隆抗體的優點在于其結構單一性和特異性強。研究者可以選擇性地制備針對某一特定生物分子的單克隆抗體，進而精確監測、分離這些分子，以及開發新的藥物和治療方法。

2、制備單克隆抗體的方法

制備單克隆抗體的方法通常包括以下幾個步驟：首先，通過免疫動物（如鼠、兔）注射目標抗原，激發其免疫系統產生多種抗體。其次，將淋巴細胞從免疫動物的脾臟或淋巴結中分離出來，融合到一種稱為骨髓瘤細胞的惡性細胞上，生成“雜交瘤（hybridoma）”細胞株。這些細胞株同時具有淋巴細胞的能夠產生抗體的特性和骨髓瘤細胞的細胞能力和生存能力。接下來，通過對細胞株進行篩選，篩選出針對特定抗原、具有單一抗體種類的細胞株。最后，從單一細胞株培養出大量同種類的單克隆抗體，用于科學研究和醫學治療。

3、單克隆抗體的應用領域

隨著單克隆抗體技術的不斷發展，其應用領域也越來越廣泛。在醫學領域，單克隆抗體被廣泛應用于生物制藥、診斷和治療等方面。例如，通過制備針對癌癥細胞表面標志物的單克隆抗體，可以實現對癌癥細胞的精準診斷和治療。此外，單克隆抗體還可以用于治療某些自身免疫性疾病、病毒和細菌感染等方面。

在科學研究領域，單克隆抗體也廣泛應用于生命科學、分子生物學等方面。例如，可以利用單克隆抗體分離或檢測特定的分子，幫助研究者深入理解生命現象，揭示疾病的發生機制。

4、單克隆抗體的發展前景

單克隆抗體技術的發展前景十分廣闊。一方面，隨著基因工程和生物技術的不斷發展，單克隆抗體生產過程的成本將進一步降低，制備工藝也將更加成熟。另一方面，單克隆抗體技術的可塑性和多樣性也將不斷增強，可以通過對單克隆抗體的修飾和組合，獲得新的特殊功能，并開拓新的應用領域。

單克隆抗體的制備步驟

1、免疫動物的選擇：

免疫動物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠產生致敏B淋巴細胞的過程。抗原通過血液循環或淋巴循環進入外周免疫器官，刺激相應B淋巴細胞克隆，使其活化、增殖，并分化成為致敏B淋巴細胞。

2、細胞融合：

采用二氧化碳氣體處死小鼠，無菌操作取出脾臟，在平皿內擠壓研磨，制備脾細胞懸液。將準備好的同系骨髓瘤細胞與小鼠脾細胞按一定比例混合，并加入促融合劑聚乙二醇。在聚乙二醇作用下，各種淋巴細胞可與骨髓瘤細胞發生融合，形成雜交瘤細胞。

3、選擇性培養：

選擇性培養的目的是篩選融合的雜交瘤細胞，一般采用HAT選擇性培養基。

4、雜交瘤陽性克隆的篩選與克隆化：

在HAT培養基中生長的雜交瘤細胞，只有少數是分泌預定特異性單克隆抗體的細胞，因此，必須進行篩選和克隆化。通常采用有限稀釋法進行雜交瘤細胞的克隆化培養。

5、單克隆抗體的大量制備：

單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內誘生法和體外培養法。

擴展資料：

單克隆抗體的優點：

1、雜交瘤可以在體外“永久”地存活并傳代，只要不發生細胞株的基因突變，就可以不斷地生產高特異性、高均一性的抗體。

2、可以用相對不純的抗原，獲得大量高度特異的、均一的抗體。

3、由于可能得到“無限量”的均一性抗體，所以適用于以標記抗體為特點的免疫學分析方法。

4、由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學功能，可用于體內的放射免疫顯像和免疫導向治療。

參考資料來源：百度百科-單克隆抗體

單克隆抗體是什么

單克隆抗體

monoclonal antibody

單一克隆產生的并針對單一抗原決定簇的均一性抗體。它見于免疫增生性疾病，也可通過雜交瘤技術人工產生。細胞雜交是20世紀60年代建立起來的一種新技術，把種內或種間細胞融合后，可成為新的細胞。這種含有雙親細胞核的細胞經有絲為兩個單核子細胞，子細胞核內含有雙親細胞的染色體。1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在細胞雜交技術的基礎上，創立雜交瘤技術，他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠脾細胞融合，成為雜交細胞系，既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性，又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養，可形成單細胞系，即單克隆。利用培養或小鼠腹腔接種的方法，便能得到大量的、高滴度的、非常均一的抗體，其結構、氨基酸順序、特異性等都是一致的，而且在培養過程中，只要沒有變異，不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結構與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。

這項新技術從根本上解決了在抗備中長期存在的特異性和可重復性問題。單克隆抗體可直接用于人類疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究，為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。

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